軟件：OriginPro9.1

素材：PAM熒光儀導(dǎo)出的PAR和ETR數(shù)據(jù)。

操作步驟

1，正確安裝Origin軟件，打開軟件

2，打開正確操作PAM測量得到的快速光曲線數(shù)據(jù)文件

3，將PAR和ETR的數(shù)據(jù)復(fù)制到Origin軟件，并編輯橫坐標(biāo)和縱坐標(biāo)注釋及單位

4，選中數(shù)據(jù)，生成散點(diǎn)圖，注意：一定一定一定要先選中數(shù)據(jù)，才能生成圖哦！

5，可以根據(jù)需求調(diào)整散點(diǎn)圖橫縱坐標(biāo)起始值，及最大值，間隔大小以及散點(diǎn)的樣式，形狀或顏色。

6，開始擬合：激活Graph，選中散點(diǎn)圖的數(shù)據(jù)點(diǎn)。

注意：一定一定一定要先選中散點(diǎn)圖中的點(diǎn)，再點(diǎn)擊工具欄！

點(diǎn)擊軟件上方的 Analysis→Fitting→NonLinearCurve Fit→Open Dialog

7，創(chuàng)建擬合方程

對(duì)話框中，Category選項(xiàng)選擇“UserDefined”（用戶自定義），再點(diǎn)擊箭頭所指按鈕，打開創(chuàng)建新方程的對(duì)話框。對(duì)話框中：Function Name一欄可對(duì)方程進(jìn)行命名（僅限英文），此次命名為“LightCurveFit”；FunctionType一欄選擇第二個(gè)“Equations”，然后點(diǎn)擊next進(jìn)行下一步。

8，編輯擬合方程

進(jìn)入?yún)?shù)設(shè)置，第一行和第二行為自變量x和因變量y，第三行為你自己需要設(shè)置的方程參數(shù)，以一元二次方程為例，設(shè)置參數(shù)a,b,c（字母和標(biāo)點(diǎn)符號(hào)必須是英文輸入法），然后點(diǎn)擊next進(jìn)行下一步。

9，設(shè)置方程式

進(jìn)入方程輸入，如圖，在紅線框出的地方輸入一元二次方程。（字母和符號(hào)必須是英文輸入法）。

y=x/(a*x^2+b*x+c)

到此處基本設(shè)置已完畢，一直點(diǎn)擊next即可，最后點(diǎn)擊finish！

10，開始擬合

點(diǎn)擊并切換至Parameters窗口，點(diǎn)擊Simplex擬合，直至Parameters內(nèi)參數(shù)不變，點(diǎn)擊Fit完成擬合。

點(diǎn)擊完Fit，可能會(huì)出現(xiàn)一個(gè)對(duì)話框，詢問是否切換到CurveFit Report Sheet。

11，查看擬合結(jié)果，修改擬合曲線注釋文本等

強(qiáng)烈建議：

分析結(jié)束后請(qǐng)盡快通過File→Save Project保存工作流程。

擬合曲線可以通過File→Export Graph導(dǎo)出。

12，計(jì)算快速光曲線參數(shù)

測量光響應(yīng)曲線時(shí)<Light Curve>程序連續(xù)照射幾個(gè)強(qiáng)度逐漸升高的光化光，一般情況下每個(gè)梯度的光化光持續(xù)時(shí)間太短而不足以使光合作用達(dá)到穩(wěn)態(tài)。因此，此時(shí)的光響應(yīng)曲線被稱為快速光曲線（RLC）。和傳統(tǒng)的光響應(yīng)曲線不同，快速光曲線反映了當(dāng)前狀態(tài)下光合作用的信息。通過對(duì)快速光曲線進(jìn)行擬合，可以得到以下幾個(gè)主要參數(shù)：

? α，單位：electrons/photons，快速光曲線的初始斜率，反映了光能利用效率。

? ETRm，單位：μmol· m-2 · s-1，最大電子傳遞速率。

? Ek，單位：μmol· m-2 · s-1，最小飽和光強(qiáng)（半飽和光強(qiáng)），反映了樣品對(duì)強(qiáng)光的耐受能力。

PamWin-3采用Eilers and Peeters（1988）的公式對(duì)快速光曲線進(jìn)行擬合，擬合公式如下：

各個(gè)參數(shù)的計(jì)算公式分別是：

以上Origin9.1進(jìn)行PAM熒光儀快速光曲線擬合操作指南請(qǐng)參考！如有其他技術(shù)問題，請(qǐng)聯(lián)系上海澤泉科技股份有限公司！